称重：
根据培养基配方的比例，将牛肉提取物，蛋白胨和nacl准确称入烧杯中。牛肉酱通常用玻璃棒挑出，在小烧杯或观察杯中称重，溶于热水，然后倒入烧杯中。也可以将其放在称量纸上，称量后直接放入水中。此时，如果将其稍加加热，牛肉糊将与称量纸分离，然后立即将纸页移开。蛋白胨吸湿性强，称重时移动迅速。另外，在混合药物时，应严格防止药物混合。羊角面包用于一种药物，或在服用一种药物后，将其洗涤并干燥，然后称重另一种药物。不要在瓶子上盖错盖子。
融化：
在上述烧杯中，可以先添加少于所需量的水，用玻璃棒充分搅拌，然后在石棉网上加热使其溶解。药物wan全溶解后，加水至所需总体积。如果准备了固体培养基，则将称量的琼脂放入溶解的药物中，然后加热使其溶解。在琼脂溶解过程中，需要搅拌以防止琼脂糊破坏烧杯。最后补上丢失的水。
ph调整：
在调节ph值之前，首先要用精密ph试纸测量培养基的原始ph值。如果ph呈酸性，则用滴管将1mol / l naoh滴加到培养基中，边搅拌边添加，并随时用ph试纸测量其ph值直至ph达到7.6。否则，请使用1mol / l hcl进行调整。请注意，不应将ph值调节得太远，以免发生回调，否则会影响介质中离子的浓度。
对于某些需要更准确ph值的微生物，可以使用酸度计调节ph值（有关用法，请参阅相关说明）。
过滤器：
趁热时，用滤纸或多层纱布过滤以利于观察结果。如果没有特殊要求，则可以省略此步骤（此实验中无需过滤）。
包装：
根据实验要求，所制备的培养基可以分为试管或锥形瓶。
在填充过程中，请注意不要让培养基粘附在试管或瓶子的嘴上，以免污染棉塞并造成污染。
（1）液体包装和包装的高度优选为试管的高度的约1/4。
（2）用于固体分装和分装的试管不得超过试管高度的1/5。灭菌后，应将其制成斜坡。分开的锥形瓶的体积不应超过锥形瓶的一半。
（3）半固体分装试管通常适合试管高度的1/3，并在灭菌后垂直凝结。
加塞：
填充培养基后，将棉塞放在试管或三角瓶的嘴上，以防止外部微生物进入培养基并造成污染，并确保良好的通风性能（将棉塞的方法固定在背面此实验）。
绷带：
堵塞后，将所有试管用麻绳绑起来，然后在卫生棉条上缠上一层牛皮纸，以防止灭菌过程中的冷凝水弄湿卫生棉条。使用标记指示介质名称，组和日期。塞子装满牛皮纸后，用麻绳将绳子包裹成松散的结。使用时很容易解开它。另外，使用标记指示介质名称，组和日期。
杀菌：
通过在121.3℃下以1.05kg / cm 2（15lb / in 2）高压灭菌20分钟，将上述培养基灭菌。如果由于特殊情况不能及时消毒，应将其放在冰箱中暂时存放。
搁置斜面：
将灭菌后的试管培养基冷却至约50℃，将试管的棉塞端置于玻璃棒上，倾斜面的长度优选为试验总长度的一半以下。
无菌检查：
将灭菌后的培养基放入37℃的温室中24-48小时，以检查灭菌是否完成。